GMP新时代VHP洁净环境消毒灭菌与确认验证

焦红江 2024-07-09

知识分享

GMP新时代VHP洁净环境

消毒灭菌与确认验证

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清洁 cleaning

去除物体表面的有机物、无机物和可见污染物的过程

消毒 disinfection

清除或杀灭传播媒介上的病原微生物以达到无害化的处理

灭菌 sterilization

杀灭或清除器械、器具和物品上的一切微生物的处理

清场/大清场/小清场/清洁/消毒/灭菌/CIP/SIP……的区别

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1、灭菌剂

可杀灭一切微生物（包括细菌芽孢），并达到无菌保证水平

甲醛、戊二醛、环氧乙烷、过氧化氢、过氧乙酸、二氧化氯

2、高效消毒剂

能杀灭一切细菌繁殖体（所括分枝杆菌）/病毒/真菌及其孢子（对细菌芽胞有一定作用）

含氯消毒剂（次氯酸钠）、臭氧

3、中效消毒剂

能杀灭分枝杆菌、真菌、病毒及细菌繁殖体等微生物（杀灭不了芽孢）

碘类（碘伏/碘酊）、醇类（乙醇/异丙醇）

酚类（苯酚、甲酚、对氯间二甲苯酚、三氯羟基二苯醚）

4、低效消毒剂

能杀灭细菌繁殖体和亲脂病毒

季铵盐类（苯扎溴铵）、双胍类（氯己定）、汞/银/铜金属离子类

中草药类（艾叶/苦参/黄芩/黄柏/金银花/野菊花）

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杀孢子剂的的选择

甲醛

过氧化氢

过氧乙酸

过氧化氢+过氧乙酸

过氧化氢+银离子

二氧化氯

次氯酸钠

杀孢子剂的杀菌效力验证（挑战菌）

黑色枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪杆菌

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清洁消毒灭菌方法开发与验证

清洁/消毒/灭菌剂的选择
清洁/消毒/灭菌工具的选择
清洁/消毒/灭菌方法的开发
清洁/消毒/灭菌方法的确认与验证
确认清洗剂/消毒剂/灭菌剂在其使用期限内有效
监测清洗剂/消毒剂/灭菌剂的微生物污染
定期评估清洁/消毒/灭菌方法的有效性

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关于无菌的几个概念

1、无菌——没有任何“活”的微生物存在。

2、无菌环境——环境中一切有生命活动的微生物的营养细胞及其芽胞或孢子都不存在。

3、无菌区——经过灭菌处理而未被污染的区域。

4、无菌操作&无菌技术——防止一切微生物进入机体或物体、保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。

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无菌保证

1、无菌环境（HVAC/过滤效率/换气次数/压差/流型/消毒/灭菌）

2、设备&管道（污染源，密闭，保护，CIP，SIP）

3、物料（原辅料/内包材/公用介质）（污染源，无菌，无菌处理）

4、人员（污染源，资质，更衣，行为规范，无菌操作）

5、生产过程控制

6、灭菌工艺

7、质量保证体系

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空间消毒

1、甲醛

2、臭氧

3、过氧化氢

表面消毒

1、乙醇

2、异丙醇

3、杀孢子剂

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设备的外表面：程度等同于洁净环境的清洁、消毒、灭菌。

清洁剂：

1、D、C级：纯化水。

2、B、A级：无菌过滤注射用水。

消毒剂：

1、75%乙醇或70%异丙醇

2、1%苯扎溴铵溶液

灭菌剂：与环境空间灭菌同时进行，VHP灭菌、杀孢子剂

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清洁消毒程序：

①清洁→②消毒→③清洁

75%乙醇或70%异丙醇消毒后可不进行清洁。
先内后外、先上后下，从最干净的区域向最脏的区域进行清洁消毒。
生产结束至清洁，不超过8小时。
清洁至消毒，消毒至清洁，均不超过4小时。
ABC消毒有效期，48小时。
D级消毒有效期，7天。

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清洁消毒频次

日常清洁消毒：

1、批生产/人员和物料活动后，对相关设备/设施外表面进行消毒。

2、C/D级生产时每批，A/B生产时每批/每班或每天/不生产时每周。

全面清洁消毒：

1、空间VHP消毒

2、A、B级每半月，C、D级每月。

可接受标准：

符合响应的环境的清洁/消毒/灭菌的可接受标准。

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HVAC系统PQ确认原则

①PQ之前对洁净厂房进行清洁（不进行消毒/灭菌）

②测试浮游菌、表面菌基线确认（消毒/灭菌前的微生物水平)；

③清洁/消毒后进行1次静态测试（建议1次-3次）；

④包括静态悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面菌（接触碟）；

⑤连续三次动态监测(GMP要求：动态测试可在常规操作、培养基模拟灌装过程中进行，也可以模拟动态）；

⑥进入日常环境监控程序；

⑦验证时静态测试微生物的意义：确认洁净室清洁、消毒、灭菌的效果。

GMP要求：测试方法可参照ISO14644

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应定期检测微生物负荷与消毒剂效力，并作趋势分析。

态静态监控均可，频次推荐：
1、最终灭菌D：1次/2周，浮游菌、表面菌。
2、最终灭菌C：1次/1周，浮游菌、表面菌。
3、最终灭菌C+A：2次/1周：浮游菌/表面菌/手套；悬浮粒子/沉降菌从宽。

4、非最终灭菌D：1次/1周，浮游菌、表面菌。

5、非最终灭菌C：2次/1周，浮游菌、表面菌。

6、非最终灭菌B：2次/1周，浮游菌、表面菌，悬浮粒子、沉降菌，从宽。

7、非最终灭菌B+A：1次/1批：悬浮粒子/浮游菌/沉降菌；表面菌/人体微生物（可轮流抽检）。

可以根据风险评估、验证结果自行制定合适的监控频次。

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VHP（Vaporized Hydrogen Peroxide）气化过氧化氢（干式灭菌法），应重点关注：系统除湿、材料选择、空调系统配合、围护结构以及安全等方面。

1、VHP 灭菌在低湿（湿度＜40%）状态灭菌效果最佳；

2、风系统管路：加厚镀锌钢板制作是可接受的；

3、P3复合风材料风管耐受性更好，耐腐蚀、免保温、密封性好；

4、VHP灭菌的房间采用的是氟碳涂层的彩钢板或不锈钢板；

5、VHP灭菌的洁净室的门推荐采用密胺树脂门；

6、每个独立的灭菌空间与其它系统相连的门均使用气密门。

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整个灭菌过程的过氧化氢汽化状态控制

过氧化氢的发生：需保证完全打断氢键，采用闪蒸方式；

过氧化氢输送：新风温湿度和风量，管路预热，管路气密性；

过程控制：饱和度，露点控制和冷点控制。

空调系统的配合

循环或非循环方式；

消毒模式：除湿-关闭冷冻水恢复室温-降频（10次左右）；

风管的密封性-风管密封圈的材质（氯丁橡胶）。

VHP输送管路的要求

注意地域和季节变化；

管路的保温，密封性和耐腐蚀性。

撰稿人 | 焦红江制药GMP工作室

责任编辑 | 邵丽竹

审核人 | 何发

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