微孔滤膜的定义
膜分离过程是利用薄膜分离混合物的一种方法。薄膜作为两相之间的选择通过性相,可使两相的某一种或多种组分透过膜,截留其他组分,从而实现不同组分之间的分离,达到分离、浓缩和纯化的目的,它主要利用流体压力差为推动力的筛分分离过程。微孔过滤、反渗透、纳滤、超滤均属于压力驱动型膜分离技术。
类型 |
渗透物 |
截留物 |
微孔过滤 |
水、溶剂溶解物、气体 |
悬浮物、颗粒、纤维和细菌(0.01~10μm) |
超滤 |
水、溶剂、离子和小分子(相对分子质量<1000) |
生化制品、胶体和大分子(相对分子质量1000~300000) |
纳滤 |
水、溶剂、价盐(相对分子质量<200) |
溶质、二价盐、糖和染料(相对分子质量200~1000) |
反渗透 |
水、溶剂 |
部悬浮物、溶质和盐 |
微孔分离过程是在流体压力差的作用下,利用膜对被分离组分的尺寸选择性,将膜孔能截留的微粒及大分子溶质截留,而使模孔不能截留的粒子或小分子溶质透过膜。
微孔滤膜操作有死端过滤(垂直流过滤)和错流过滤(切线流过滤)。死端过滤主要用于固体含量较小的流体和一般处理规模,膜大多数被制成一次性的。分析常用的过滤流动相和一次性注射式的过滤膜就是死端过滤。见下图。
微孔滤过滤原理
微孔滤膜的过滤机理主要为截留作用。截留作用可以分为以下几种:机械截留、吸附截留、架桥截留、在膜内部的网络中截留。如下图:
1、机械截留:即筛分作用。指膜具有截留比其孔径大或其孔径相当的微粒等杂质的作用。
2、物理作用或吸附截留作用:除了考虑筛分作用,还要考虑其他因素的影响,其中包括吸附和电性能的影响。
3、架桥作用:在孔的入口处,微粒因为架桥作用也同样可被截留。
4、网络型膜的网络截留作用。这种截留是将微粒截留在膜的内部,而不是膜的表面。
从上可见,筛分作用很重要,微粒等杂质与孔壁之间的相互作用有时较孔径大小显得更为重要。
微孔过滤主要应用于分离大分子、胶体粒子、蛋白质以及其他微粒,他们的分离机理是根据分子或微粒的物理化学性能、所使用的膜的物理化学性能和他们之间的相互作用(如大小、形状、电性能)不同而实现分离。
微孔过滤的过程一般有三个阶段:
1、初始阶段:比膜孔径大的粒子被截留在膜的表面,比膜小的粒子进入模孔,其中一些粒子由于各种力的作用被吸附在膜孔内,减少了膜孔的有效直径;
2、过滤中期:微粒在膜表面开始形成滤饼层,膜孔内部吸附逐渐趋向于饱和;
3、后期阶段:随着更多微粒在膜表面被截留,膜孔内部吸附也趋于饱和,微粒开始堵塞膜孔,最终使膜通量趋于稳定继而不断的下降。
通过上述的3个过程,就能理解在溶出过程中滤膜吸附能达到饱和,随着过滤次数的增加越来越难过滤。
微孔滤膜的种类和用途
1、尺寸
常用的针式过滤器有4mm、13mm、25mm、33mm规格,针头式滤器规格的选择通常是与样品的体积有关:通常样品量小于1mL时,选用4mm直径的针头式滤器;样品量在1-10mL时,选用13mm直径的针头式滤器;样品量在10-100mL时,选用25mm直径的针头式滤器;样品量在10-200mL时,选用33mm直径的针头式滤器。
尺寸 |
4mm |
13mm |
25mm |
33mm |
过滤体积(cm2) |
0.1 |
0.65 |
3.9 |
4.6 |
残留体积(ml) |
≤1 |
1-10 |
10-100 |
10-200 |
最高操作压力(psi) |
<10 |
<25 |
<100 |
<125 |
2、孔径
常用的孔径有0.22μm,0.45μm,0.8μm,1.0μm
孔径 |
范围 |
0.22 |
能去除样品、流动相中极细颗粒的要求;可以达到GMP或者药典规定的除菌99.99%的要求。适用于要求高较高的溶剂、样品的处理,如色谱用离子对试剂、超纯。水、质谱分析溶剂的样品等过滤。用于小于3μm、 3μm或更大填料色色谱系统。 |
0.45 |
能滤除大多数细菌微生物,适用于常规样品、流动相过滤,能够满足一般色谱要求 |
0.8-1.0 |
去除大多数不溶性微粒,适用于紫外等对样品哟求相对较低的分析检测,效率较0.45μm滤膜高,尤其适用于难溶性辅料多、混悬剂和粘合剂用量多、且使用紫外检测的口服固体制剂溶出检测。 |
1-5μm |
过滤较大颗粒的杂质或者用于难以处理的浑浊溶液的预处理可先以1-5μm滤膜过滤再用相应滤膜进行过滤。 |
3、种类
微孔过滤器滤膜主要有:醋酸纤维素膜、混合纤维素酯微孔滤膜,尼龙滤膜,聚四氟乙烯滤膜,聚偏氟乙烯膜(PVDF),聚醚砜滤膜,聚丙烯过滤膜(PP滤膜)。
溶剂属性 |
膜材质 |
适用范围 |
水系 |
醋酸纤维素(CA) |
对蛋白吸附比较低、亲水性好,较强的化学兼容性;pH3-7; 适用于抗菌素、球蛋白、疫苗血清及组织培养基等过滤;液体除菌、微粒过滤等水基样品。 |
聚醚砜(PES) |
亲水性膜,通量大,既有良好的吞吐量;对蛋白吸附力低,提高蛋白回收率应用;耐老化、抗蠕变性好,耐化学试剂性能好,可用于高温液体过滤,适用于医药行业生物和血清的过滤、大输液抗菌素等终端过滤、食品行业饮料、酒等终端过滤、超纯水终端过滤等。 |
|
聚偏二氟乙烯(PVDF) |
亲水系抗老化、耐溶剂性能优异,可在-40℃~150℃下长期使用,低蛋白吸附。可在室温下耐各种强酸碱即溶剂的腐蚀。可用于一般生物样品过两次,以及高蛋白回收率的样品过滤。可溶于DMAC、NMP等强极性溶剂。 |
|
混合纤维素膜(MAC) |
孔隙率高,截留效果好;亲水性好,水通量大;不耐有机溶液和强酸、强碱溶液。具有良好的机械强度、热稳定强、吸附低等特点。适用于实验室、小生产工艺中除菌、除微粒的过滤;培养基、培养液的除菌过滤等 |
|
有机系(过滤水系需要预先浸润(乙醇)) |
疏水聚四氟乙烯PTFE |
可过滤几乎所有的有机溶剂、机械强度高、能耐高温液体、过滤空气和颗粒杂质。除非预先浸润,否则过滤水溶液由于张力阻碍将难以推进过滤样品。 |
水系有机通用(耐有机、过滤水系不需要预先浸润) |
尼龙 |
用于碱性溶液和有机溶剂过滤;尼龙膜具有非常好的机械强度,吸附性强,能耐受大多数有机溶剂和多数碱性溶液,特别适合于碱性溶液的过滤。用于有机溶剂过滤,如HPLC流动相除颗粒过滤时,尼龙膜比PTFE膜更经济实用。由于尼龙膜的吸附性能相对较高,一般不推荐用于培养基过滤、或蛋白液等生物样品的过滤,以免因吸附而损失样品。在这种情况下,通常采用低吸附的醋酸纤维素膜(CA)更为适用。实验室最经济的选择,不仅可以过滤水系样品,还兼容大多数有机溶剂,但不能用于酸溶液和卤烃、芳烃等溶液的过滤。 |
亲水PTFE |
万能膜,机械强度高,能承受高温液体,能耐高温液体、过滤空气和颗粒杂质。兼容一切酸碱溶液,严苛实验室最佳选择。 |
4、兼容性
不同的滤膜对不同的滤膜兼容性见下表。
注意事项
1、膜不分反正,但最好光滑面向上,粗糟一面向下过滤效果会好。
2、在药品分析溶出实验中,滤膜吸附是使用微孔滤膜最多的弊端,影响滤膜吸附的因素有很多,包括滤膜的直径、孔径、材料、过滤介质的种类、离子强度、pH值、药物本身的性质等。不同材质的滤膜与不同被过滤化合物之间的氢键、范德华力、电荷吸附等相互作用力不同,吸附的程度也不同。也有文献报道不同pH的缓冲盐、不同的稀释剂(如甲醇)可以减少或消除吸附。
3、在药品分析有关物质实验中,需要关注滤膜过滤后是否产生新的杂质。
总结
微孔滤膜在现在的实验中起着很重要的作用。微孔滤膜的种类和材质也各有不同,根据自身样品选择合适的微孔滤膜,在使用时进行考察,证明滤膜对结果无影响。
本文为笔者学习滤膜知识总结和心得,如有错误,敬请指出。
参考文献:
1、陈昌俊 微孔滤膜(二)净水技术 67(1999)1
2、郑国刚 化学药品普通口服固体制剂溶出度方法验证易忽视的几个问题 http://www.cde.org.cn/dzkw.do?method=largePage&id=2272
3、许振良 马炳荣主编 微滤技术与应用
4、黄庆林、肖长发、胡晓宇、边丽娜 聚四氟乙烯膜的制备及性能 高分子材料科学与工程 第26卷第5期
5、李伟,刘玉灿,段晋明. 微滤膜吸附效应对液相色谱-三重四极杆质谱直接进样检测水样中农药残留的影响. 分析化学,2015 (11):1761-1765.
本文来源于药事纵横
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