国际学术刊物《病毒学方法杂志》日前在线发表了中科院上海巴斯德研究所黄忠课题组关于成功制备针对肠道病毒EV71的中和性单克隆抗体的最新研究成果。有关专家认为,这项研究成果为EV71感染的早期诊断和单克隆抗体药物研发奠定了良好基础。
“肠道病毒EV71是引起手足口病的主要病原体。”黄忠介绍说,手足口病是常发于5岁以下儿童的传染性疾病,部分患者会出现脑炎、肺水肿以及瘫痪等严重神经症状,甚至导致死亡。
近几年,手足口病在亚太地区广泛流行,对儿童的健康成长造成严重威胁。在中国,据卫生部统计,仅2010年和2011年就有339万余例感染,其中死亡 1414例。“但是,目前缺乏简便快速检测EV71病毒的方法,更没有预防性疫苗和治疗性药物。”因此开发相应的诊断试剂和抗病毒药物对于预防和治疗手足口病意义重大。
在黄忠指导下,博士研究生库志强、石金平和刘庆伟等利用基因工程手段制备了不具感染性的EV71病毒样颗粒作为免疫原,通过免疫小鼠使其产生具有抗病毒能力的中和抗体。然后,利用传统的杂交瘤技术制备了三株能够分泌中和抗体的杂交瘤细胞D5、C4和H7。
各项生化分析表明,这些单克隆抗体能够特异地识别EV71病毒表面的衣壳蛋白。免疫荧光实验显示,这些抗体还能够检测到感染细胞中的EV71病毒。因此,黄忠表示:“这些单克隆抗体可以用于进一步开发针对EV71的诊断试剂盒。”
相关专家认为,更重要的是,在体外实验中,这些单克隆抗体在非常低的浓度下还能够有效阻止病毒侵入细胞,表明其具有被开发成用于治疗的人源化单克隆抗体药物的潜力。
该项研究得到了中科院“百人计划”的资助。
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本文的目的是为了探讨注射用甲苯磺酸奥马环素的无菌方法开发及验证。通过采用薄膜过滤法,使用1mol·L-1硫酸镁溶液对样品及所用培养基进行处理,pH 7.0 氯化钠蛋白胨缓冲液(含 0.1% 组氨酸、0.3% 卵磷脂和 3% 吐温 80)进行冲洗,有效地消除了样品的抑菌性。得出的结论为采用 1 mol·L-1 硫酸镁溶液及 pH 7.0 氯化钠蛋白胨缓冲液(含 0.1% 组氨酸、0.3% 卵磷脂和 3% 吐温 80)可以有效地消除注射用甲苯磺酸奥马环素的抑菌性能,可以将该方法用于注射用甲苯磺酸奥马环素的无菌方法验证。
作者:印萍
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