VHP灭菌验证的常见问题

2024-01-18

VHP是英文Vaporized Hydrogen Peroxide的缩写，意为气态过氧化氢，VHP技术是一种低温生物除污染方法，适用于对密闭空间或物体表面进行微生物除污染。

VHP灭菌主要利用气化过氧化氢所产生的氢氧自由基来进行。氢氧自由基通过攻击并破坏蛋白质、脂肪等生命体所需物质来杀灭各类微生物，达到灭菌目的。

近些年随着VHP技术的发展，行业在应用VHP技术进行空间灭菌方面越来越广泛。在当今制药工业中，过氧化氢已逐渐取代传统灭菌方式，成为表面或空间消毒及灭菌的常用方法，过氧化氢由水和氧气组成，两者均很安全，在杀菌有效性、人员安全性、材料兼容性以及环境有好性方面具有明显优势。

但是，行业在使用VHP进行空间灭菌及验证的过程中，仍存在很多问题。

目前行业里应用VHP主要有两种方式。

一、和空调系统集成，通过空调系统的风管将一定浓度的VHP通入洁净区，维持一定时间后通过排风系统排出。

二、通过在洁净区内的不同位置放置多个移动式VHP小车对洁净区进行灭菌/消毒。

本文针对VHP的应用及验证过程中的常见问题进行举例，希望大家对VHP在空间灭菌方面的使用有更多了解。

一、VHP用于洁净区环境灭菌/消毒的通用程序：

除湿－降低待灭菌空间的相对湿度，保证一定温度（根据具体情况进行调试验证）

通入VHP气体－增加注射速率，减少循环时间，从而快速增加空间中过氧化氢气体浓度

灭菌－保持一定的过氧化氢气体浓度，以具有恒定的“杀菌”能力

排风置换－快速减少空间中的过氧化氢气体浓度，尽快降到人体安全值以下

二、灭菌关键工艺参数

企业在建立VHP环境灭菌的过程中常常未能明确全部的灭菌参数。一般来说，VHP环境灭菌的参数应该包括：环境温度、环境湿度、通入VHP气体的速度、浓度、灭菌时间、VHP移动小车的位置、喷口方向等。

企业应针对特定区域计算整体空间体积，并确定能够满足特定灭菌浓度时使用的VHP溶液的量，在灭菌前后检查并记录消耗的VHP溶液体积是否符合预期标准。

三、环境灭菌/消毒验证的常见问题

欧盟GMP附录第4.36条提到：如果洁净室和相关表面使用熏蒸或汽相消毒（例如VHP），应了解并验证任何熏蒸剂和分散系统的有效性。

企业在开展VHP灭菌验证时，关注更多的是灭菌后生物指示剂经过培养是否得到有效灭菌，以此对VHP的有效性得出结论，仅仅考虑这一点还远远不够。

应证明灭菌过程的有效性、稳定性及可靠性。

应建立VHP灭菌操作方法，在验证方案中描述如何开展验证过程，以移动灭菌小车为例，大致包含以下步骤：

1、测试前应对产生VHP的设备或设施完成设备确认及必要的计量，保证相关工艺参数是准确的；

2、将空间灭菌系统主机移动到要灭菌的位置，接通空间灭菌系统主机的电源，调整好喷口角度及喷口方向位置，保证喷口处前方3米以上无遮挡物，满足干雾正常的扩散；（描述具体的灭菌区域，使用的VHP灭菌器数量并记录设备编号。）

3、在验证方案中详细描述每个区域预计加入的VHP量，开始灭菌前检查空间灭菌系统VHP重量是否正确并符合需求。实施过程中在关键点位检测VHP浓度是否符合要求；

4、应经过风险评估确定合适的布点位置来放置生物指示剂和化学指示剂；

5、开启灭菌器，使空间环境相对密闭，保持一定时间（必要时使用仪器测试环境中的VHP浓度是否达标）；

6、排风、排残，测试VHP残留是否符合要求；

7、收集生物指示剂并现场检查化学指示剂的颜色变化情况；

8、检查加入的VHP液体消耗量是否符合预期，并记录消耗数值；

9、对生物指示剂进行培养，观察培养结果；

10、汇总全部数据，对环境灭菌/消毒方法进行判断，得出验证结论。

撰稿人 | 智药人生

责任编辑 | 胡静

审核人 | 何发