基于伤寒沙门菌抑制效果优化益智仁水提取物的制备工艺

张晓芸 1 刘栋 2* 杨启昌 3 金诗语 4 周晓洁 1 2026-07-10

本文旨在探究益智仁（Alpinia oxyphylla Miq.）抗伤寒沙门菌（Salmonella typhi）的最佳水提工艺，为抗微生物药物制备的工艺设计及优化提供依据。本研究采用单因素控制变量法：固定益智仁与纯化水的料液比为 1:5，分别在 50℃、75℃、100℃条件下加热回流提取 6 h，每组试验重复 3 次；收集上清液按 30:1 比例冷冻干燥浓缩（冷阱温度为 -45℃，真空气压为 10 Pa，搁板温度为 -10℃）制备提取终产物并计算提取得率，采用纸片扩散法检测不同工艺所得产物对伤寒沙门菌的抑制活性，通过最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）明确药效最低限度，联合筛选最优提取温度参数。结果显示，50℃、75℃、100℃回流温度下制备的益智仁水提取物得率分别为 3.1±0.00%、4.7±0.00%、7.5±0.00%，三种提取物均对伤寒沙门菌有抑制作用，显著性分别为（P ＞ 0.05）（P ＜ 0.001）、（P ＜ 0.001），抑菌圈直径分别为 6.60±0.15 mm、9.44±0.35 mm、16.26±0.32 mm，MIC 分别为 1.000 g/mL、0.500 g/mL、0.125 g/mL，MBC 分别为 2.00 g/mL、1.00 g/mL、0.25 g/mL，其中 100℃提取工艺的产物得率最高，抑菌效果最显著，MIC 和 MBC 均为最低，因此可确定：益智仁与纯化水料液比 1:5、100℃加热回流 6 h，重复提取 3 次后按 30:1 冷冻干燥浓缩，为益智仁抑制伤寒沙门菌活性的最佳制备工艺。结论：该工艺是益智仁抗伤寒沙门菌活性成分的最佳制备工艺，稳定性高、操作简单、效果确切，可为益智仁相关抗微生物药物的开发工艺设计提供切实可行的参考。

Part0 前言

益智仁（Alpinia oxyphylla Miq.）别名益智子、益智，为姜科（Zingiberaceae）山姜属（Alpinia）植物益智的干燥成熟果实，是我国传统“四大南药”之一，主产于广西壮族自治区、云南省、海南省、广东省、福建省等华南及西南地区^[1-3]。益智仁性温味辛，归脾、肾经，化学成分组成复杂，主要包含良姜素、白杨素、益智酮 A、益智酮 B、益智醇等多种活性成分，传统功效为温脾止泻、暖肾固精、缩尿，临床多用于治疗脾寒泄泻、腹中冷痛、口多涎唾、肾虚遗尿、小便频数、遗精白浊等病症 ^[4-6]。现代药理研究与临床应用表明，益智仁及其活性成分在腹泻、阿尔茨海默病、肿瘤、肾病、骨代谢疾病等多种疾病的防治中具备潜在应用价值，目前相关基础研究与临床探索已取得一定进展^[7-9]。伤寒沙门菌（Salmonella typhi）是沙门菌属（Salmonella）中流行范围最广、致病性较强的血清型之一，属于人兽共患的食源性消化系统致病菌。该菌可通过被污染的食物、水源等途径侵入人体，借助其独特的免疫逃逸机制逃避宿主免疫系统的识别与清除，进而引发持续性感染，严重时可导致伤寒等急性肠道传染病，对人类健康与公共卫生安全构成严重威胁^[10-12]。

目前，国内外学者已围绕益智仁有效成分的分离提取工艺开展了多项研究，但现有工艺普遍存在生产成本高、制备流程复杂、有效成分提取率低等问题，且针对益智仁提取物抗伤寒沙门菌的工艺优化与制剂研发相关研究较为匮乏 ^[13-15]。上述问题极大制约了益智仁在抗微生物领域的工业化量产、加工工艺改良与临床应用拓展。因此，优化益智仁抗伤寒沙门菌的水提工艺，明确最优工艺参数，对完善其工艺设计、推动生产流程升级、促进益智仁资源的高效开发与利用具有重要的理论指导意义和实际应用价值。

本研究采用常用且简便易行的水加热提取结合高倍浓缩工艺处理益智仁有效成分，以提取回流温度作为单一变量，结合提取物对伤寒沙门菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度（MIC）及最小杀菌浓度（MBC）三类抑菌活性指标，从有效性和量效关系两个维度，综合筛选得到益智仁抗伤寒沙门菌提取物制备工艺的最优回流温度参数，可为天然产物抗微生物功效相关新药开发的工艺优化与设计提供科学依据。

Part1 材料与方法

1.1

材料

伤寒沙门菌 CMCC（B）50071 购自上海鲁微，益智仁购自北京同仁堂；0.22 μm 针式过滤器、麦氏比浊管购自湖南比克曼，营养琼脂培养基、营养肉汤培养基购自济南百博，规格为 6 mm×0.7 mm 的无菌空白药敏纸片购自英国 Oxoid ；204178 型电子数显游标卡尺购自德国 SYNTEK，SPX-80 B 生化温培养箱购自天津赛得利斯，THZ - 100 型恒温培养摇床购自上海叶拓，RV 10 auto pro V 型旋转蒸发仪购自德国艾卡，Alpha 1-2 LDplus 型冻干机购自德国 Christ，WP-UPS-10/20 型全自动纯水仪购自四川沃特浦。

1.2

方法

1.2.1

益智仁水提物抑菌成分的制备工艺

将益智仁粉碎后过 80 目筛，称取 200 g 益智仁粉末室温浸泡于 1 L 纯化水中 2 h（即益智仁粉末与纯化水的料液比为 1:5），分别置于 50℃、75℃、100℃条件下回流加热 6 h，该过程重复 3 次；随后于 10000 rpm 条件下离心 1 h，合并所有上清液，按 30:1 的比例进行冷冻干燥，冷冻干燥参数设置为：冷肼温度为 -45℃，真空气压为 10 Pa，搁板温度为 -10℃，当提取物与搁板的温度差小于 1℃时视为达到干燥终点，即得到本次实验所用药物。

1.2.2

益智仁水提物抑菌成分的得率分析

对冷冻干燥后得到的益智仁水提物抑菌成分进行称重，得率计算公式为：益智仁水提物抑菌成分得率 =（冷冻干燥后提取物净重 / 原益智仁粉末重量）×100%。

1.2.3

益智仁水提物抑制伤寒沙门菌的抑菌圈测定

称取 2 g 试验药物溶于 1 mL 纯化水，经 0.22 μm针式过滤器连续过滤 2 次，得到药物浓度为 2 g/mL的无菌药液。将伤寒沙门菌用无菌水配制成浓度为1.5×10 ⁷ cfu 的菌悬液，用移液枪吸取 20 μL 菌液滴于9 cm 的营养琼脂培养基表面，涂抹均匀后，放置直径6 mm 的无菌空白药敏纸片。分别用移液枪吸取 20 μL 经 50℃、75℃、100℃制备的无菌药液，滴加至药敏纸片，待药液完全浸润后，即得到 50℃、75℃、100℃三个给药组；另以纯化水按照相同方法操作，设置为对照组。将所有培养皿置于 37℃培养箱内培养 24 h，随后用卡尺测量抑菌圈直径。

1.2.4

益智仁水提物抑制伤寒沙门菌的量效关系测定

将 2 g 固态终产物溶于 1 mL 无菌肉汤，经 0.22 μm针式过滤器连续过滤 2 次后，采用倍半稀释法设置 10个浓度组，初始药物浓度为 2 g/mL。将伤寒沙门菌用无菌水调整浓度至 1.5×10 ⁸ cfu，用移液枪吸取 100 μL 菌液（该微量体积忽略不计）加入各组，混匀后体系中最终菌浓度为 1.5×10 ⁷ cfu。置于 37℃培养箱内培养 24 h后，通过观察培养液浑浊程度判定 MIC。取所有澄清培养物摇匀后，用移液枪吸取 20 μL 混悬液滴于 9 cm 营养琼脂培养基，涂抹均匀后，将培养皿置于 37℃培养箱内培养 24 h，通过观察菌落生长情况判定 MBC。

1.2.5

统计学方法

使用 Graphpad Prism 6.01 软件进行统计分析，组间差异采用单因素方差分析，以 P ＜ 0.05 表示结果具有统计学意义。

Part2 结果

2.1

不同制备工艺下益智仁水提物抑菌成分的得率

如图 1 所示，在 50℃、75℃和 100℃回流温度条件下制备得到的益智仁水提物抑菌成分，经冷冻干燥后获得的粉末重量分别为 6.11±0.56 g、9.40±0.71 g、15.19±0.37 g，得率分别为 3.1±0.00%、4.7±0.00%、7.5±0.00%，说明益智仁水提物抑菌成分的提取效率和产物得率随回流温度的上升而增加。

图 1 不同回流温度的提取物得率变化图

2.2

不同制备工艺下益智仁水提物对伤寒沙门菌的抑制作用

如图 2 所示，对照组对伤寒沙门菌的抑菌圈直径为 6.00±0.00 mm，采用 50℃、75℃和 100℃回流温度制备得到的益智仁水提物，抑菌圈直径分别为6.60±0.15 mm、9.44±0.35 mm、16.26±0.32 mm，说明以水为溶剂经加热回流制备得到的益智仁水提物可有效抑制伤寒沙门菌。与对照组的抑菌圈结果相比，50℃、75℃和 100℃回流温度工艺条件下差异显著性分别为（P > 0.05）、（P < 0.001）和（P < 0.001），说明抑菌效果的显著性随回流温度的上升而增大。

图 2 不同回流温度的抑菌圈直径统计图

2.3

不同制备工艺下益智仁水提物与抑制伤寒沙门菌作用的量效关系

如图 3 所示，由 MIC 和 MBC 试验结果可得，50℃、75℃和 100℃回流温度下制备得到的益智仁水提物，对伤寒沙门菌的 MIC 分别为 1.000 g/mL、0.500 g/mL、0.125 g/mL，MBC 分别为 2.00 g/mL、1.00 g/mL、0.25 g/mL，说明益智仁水提物对伤寒沙门菌的抑制作用存在明显的量效关系，且其抗菌活性与益智仁水提物制备工艺中的回流提取温度密切相关。

图 3 不同回流温度的 MIC、MBC 变化图

Part3 讨论

本研究以水为提取溶剂，固定益智仁与纯化水料液比为 1:5，仅将回流提取温度作为制备工艺的单一变量，经加热回流 6 h，重复提取 3 次后，按照 30:1 比例进行冷冻干燥（冷肼温度为 -45℃，真空气压为 10 Pa，搁板温度为 -10℃）浓缩得到终产物。50℃、75℃和 100℃提取条件下的产物得率分别为 3.1±0.00%、4.7±0.00%、7.5±0.00%，说明提取温度是影响提取物得率的关键因素之一，100℃可最大程度溶出益智仁中的抑菌活性成分。本研究以提取物对伤寒沙门菌的抑菌圈直径、MIC及 MBC 作为抑菌活性评价和制备工艺优化的共同指标，结果显示：与对照组相比，50℃回流提取工艺的抑菌圈无显著性差异（P >0.05），且抑菌圈直径最小，为6.60±0.15 mm ；75℃和 100℃回流提取工艺的抑菌圈均与对照组存在显著性差异（P < 0.001），其中 100℃回流温度的抑菌圈直径为 16.26±0.32 mm，优于 75℃回流温度的抑菌圈直径 9.44±0.35 mm ；同时，100℃回流提取条件下的 MIC 与 MBC 均为三组中最低，抑菌效果优于 50℃和 75℃提取组。本研究前期通过气质联用色谱（GCMS）技术对益智仁 100℃纯化水提取物的成分进行检测，结果显示提取物中主要活性成分为有机酸类，其中十八烷酸占比为 44.27%、棕榈酸占比为 26.18%、己酸占比为 8.15%、10- 羟基癸酸占比为 7.83%，次要成分为：3- 羟基十二烷酸占比为 1.78%、顺式 -13- 二十碳烯酸占比为 1.58%、戊酸占比为 1.21%、庚酸占比为1.13%、壬酸占比为 1.06%、油酸占比为 0.87%、丁酸占比为 0.47%，这类有机酸类活性物质协同构成了益智仁水提取物稳定的抗伤寒沙门菌成分体系 ^[16]。综上结果表明，益智仁水提物的整体抑菌效果与制备工艺中的回流温度参数呈高度正相关，本研究采用的水作溶剂（料液比 1:5）、100℃加热回流提取 3 次、按 30:1 冷冻干燥浓缩（冷肼温度为 -45℃，真空气压为 10 Pa，搁板温度为 -10℃）的方法路线高效可行，所制备的益智仁水提物可有效抑制伤寒沙门菌，为该提取工艺优化及相关制药研发提供了科学依据。

但该工艺从实验室向中试放大仍需要进一步探索优化：实验室提取工序可采用 1:5 的低溶剂倍量，在100℃加热提取 6 h 并重复操作 3 次；但中试生产采用提取罐时，易因药材堆积密度较大，溶剂淹没物料不充分，导致提取不均和局部过热等问题，实际中试阶段可将料液比适当提高并增设强制循环装置，以保证温度均匀和提取充分。浓缩环节要求将提取液按 30:1 浓缩至高浓度稠膏，采用常规蒸发器浓缩时易发生结垢焦化，因此建议中试阶段采用刮板式薄膜蒸发或低温真空浓缩设备。本研究采用的冷冻干燥参数（冷阱温度为 -45℃、真空度为 10 Pa、搁板温度为 -10℃）均可在工业冻干机上实现，但高含固量物料冻干时传质阻力极大，会导致干燥周期成倍延长，且搁板供热易导致物料熔化塌陷，因此在中试前宜通过稀释浓缩液降低固含量或评估微波真空干燥等替代方案的可行性。简而言之，该提取制备路线虽在实验室条件下可行，但直接线性放大至中试阶段存在一定风险，需对各工艺环节进行调整优化并开展预验证，方可顺利实现中试转化。基于上述中试可行性分析，明确关键工艺参数（CPP）与关键质量属性（CQA）的映射关系是实现中试转化的核心。本研究以提取回流温度为单一变量，该变量可直接调控益智仁中十八烷酸、棕榈酸等有机酸指标成分的溶出速率与热降解动力学，属于关键工艺参数（CPP），与成分得率这一关键质量属性（CQA）高度关联。通过进一步探索各环节参数，建立 CPP-CQA 关联数据库，可构筑稳健的设计空间，保障作为中药配方颗粒中间体或功能食品原料的益智仁水提冻干粉实现批间质量一致性；该工艺路线经参数调适后，可经济地衔接中试与规模化生产，具备良好的市场供给可行性，产业化前景明晰。

消化系统感染性疾病，尤其是由伤寒沙门菌引起的伤寒热，至今仍在全球范围内构成严峻的公共卫生挑战，严重损害人类健康并造成显著的社会经济负担 ^[17-18]。尽管抗生素疗法是控制此类感染的核心手段，但耐药菌株的持续出现与广泛传播，已显著削弱了现有抗菌药物的临床疗效，亟须挖掘新的抗感染药物 ^[19-21]。天然产物因其结构多样性、生物相容性及独特抗菌性，长久以来被视为创新药物先导化合物的重要来源^[22-24]。然而，制约其临床转化与产业化的关键瓶颈之一在于相关提取物制备工艺的严重匮乏与标准缺失。当前多数针对天然产物的研究仍停留在粗提物的抗菌活性筛选阶段，对于提取温度、溶剂极性、料液比例、提取时间、纯化步骤及干燥方式等工艺参数如何系统影响最终产物的抗菌效能，尚缺乏深入的制备工艺研究。这一空白导致大量具有潜在价值的天然产物难以实现可重复、高活性的规模化制备，进而阻碍了其药效物质基础解析与后续制剂合理开发。针对这一现实困境，将抗菌效果作为天然产物提取制备工艺优化与流程验证的关键评价指标，具有显著的理论研究价值与现实指导意义。

具体而言，若建立以伤寒沙门菌标准菌株及临床分离耐药株为靶标的研究体系，采用微量肉汤稀释法、琼脂扩散法或时间 - 杀菌曲线等标准化抗菌敏感性测试手段，定量测定不同工艺条件下所得提取物对目标病原体的 MIC、MBC 及半数抑制浓度（IC50），再通过响应面法、正交试验或正交偏最小二乘判别分析等多变量统计建模策略，能够有效甄别影响抗菌活性的核心工艺节点^[25-27]。在工艺优化中引入抗菌活性的生物效价作为归一化指标的思路，不仅可以避免单纯追求得率而损失活性的偏差，还能将不同批次、不同来源原料之间的质量波动纳入可控范围，从而构建“抑菌活性导向”的制备工艺标准操作规程。这一策略的深层优势在于可直接以药物生物学功能为评价终点，高效整合提取物中多组分可能存在的协同或拮抗效应，规避了以单一化学标志物评价工艺时可能产生的生物活性丢失但指标成分合格的现象，因而更贴近药物研发和临床应用的真实需求。从中医药现代化的视角审视，我国拥有极为丰富的抗感染天然药物资源，其传统疗效已为大量临床实践所佐证，但多数仍沿用“水煎煮”或“醇沉”等经验性工艺，缺乏针对特定消化系统致病菌的生物活性导向优化数据支撑^[28-30]。采用上述以抗菌效果为锚点优化制备工艺参数的研究范式，有望系统揭示传统中药复方或单味药中真正发挥抗伤寒沙门菌作用的关键组分及其最佳获取条件，进而为建立质量控制标准、开发有效部位或有效成分新药、设计新型中药制剂提供可靠的理论依据与工艺原型。此外，该研究路径亦有助于反向解析天然产物中多靶点抗菌机制，例如抑制沙门菌毒力岛表达、破坏外膜完整性、干扰群体感应或抑制生物膜形成，从而为克服抗生素耐药性提供全新策略 ^[31-32]。

综上所述，确立以抗菌活性为导向的天然产物提取制备工艺优化体系，不仅直接回应了消化系统感染性疾病的临床迫切需求，更填补了天然产物应用开发中工艺研究与药理评价之间的断层，为中医药领域针对消化系统感染性疾病的新型抗感染药物制备奠定了坚实基石，这一跨学科整合思路的推广与深化，或将推动我国自主知识产权的植物源抗感染制剂的研发进程，最终服务于全球感染防控与健康保障的战略目标。

参考文献

[1] 颜子杰，张琳，韩鑫瑶，等 . 益智仁 - 防风通过 PI3K/Akt/mTOR 信号通路调控 NLRP3 炎性小体改善糖尿病肾病小鼠炎症反应 [J]. 中国中药杂志，2025，50(10)：2798-2809.

[2] 段丽红，王春宝，吴正治，等 . 益智仁在疾病中的研究进展 [J]. 深圳中西医结合杂志，2023，33(10)：124-128.

[3] ZHANG Q，ZHENG Y，HU X，et al. Ethnopharmacological uses, phytochemistry, biological activities, and therapeutic applications of Alpinia oxyphylla Miquel: A review[J]. Journal of Ethnopharmacol. 2018，224：149-168.

[4] LIAO J，ZHAO X. Recent research progress on the chemical constituents, pharmacology, and pharmacokinetics of alpinae oxyphyllae fructus[J]. Molecules，2024，29(16)：3905.

[5] 赵梦帆，杜秋争，左莉华，等 . 益智仁在神经系统中作用机制的研究进展 [J]. 中药药理与临床，2021，37(3)：230-235.

[6] WANG X，WANG J，BI H，et al. Research progress in the extraction and purification, structural characteristics, pharmacological activities, structure-activity relationships, and applications from A lpinia oxyphylla M iq. polysaccharides[J]. International Journal of Biological Macromolecules，2025，315(Part 1)：144387.

[7] WEI Y，GAO K，SUN Y，et al. Neuroprotective Effects and Mechanisms of Alpiniae oxyphyllae Fructus, a Medicinal and Edible Homologous Herb: Research Advances[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2025，26(13)：6230.

[8] 陈萍，王培培，焦泽沼，等 . 益智仁的化学成分及药理活性研究进展 [J]. 现代药物与临床，2013，28(4)：617-623.

[9] DONG J，LI H，ZHOU M，et al. Four new diarylheptanoids and two new terpenoids from the fruits of Alpinia oxyphylla and their anti-inflammatory activities[J]. Chinese Journal of Natural Medicines，2024，22(10): 929-936.

[10] GBD 2017 Typhoid and Paratyphoid Collaborators. The global burden of typhoid and paratyphoid fevers: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017[J]. The Lancet Infectious Diseases，2019，19(4)： 369-381.

[11] 蒋丽，陈文大，韦立莉，等 . 沙门菌脓毒血症及其发病机制研究进展 [J]. 中国感染控制杂志，2026，25(1)：131-136.

[12] CAREY M E，DYSON Z A，INGLE D J，et al. Global diversity and antimicrobial resistance of typhoid fever pathogens: Insights from a meta-analysis of 13,000 Salmonella Typhi genomes[J]. Elife. 2023，12：e85867.

[13] 何荧珠，白亚娟，马泽，等 . 超声波辅助酶法提取益智仁多糖的工艺优化及其抗炎活性 [J]. 现代食品科技，2025，41(3)：222-233.

[14] 段宙位，陈婷，陈龙，等 . 益智仁壳多酚不同提取工艺优化及其提取物的抗氧化性比较 [J]. 食品科技，2021，46(4)：180-187.

[15] KUEHN R，RAHDEN P，HUSSAIN H S，et al. Enteric (typhoid and paratyphoid) fever[J]. Lancet. 2025，406(10509)：1283-1294.

[16] ZHANG X Y，LIU D，YANG Q C，et al. Chemical composition and effect of aqueous extract of alpinia oxyphylla Miq. on inhibition of salmonella typhi[J]. Asia Pacific Journal of Clinical Medical Research，2025，1(5)：1-6.

[17] GBD 2021 Diarrhoeal Diseases Collaborators. Global, regional, and national age-sex-specific burden of diarrhoeal diseases, their risk factors, and aetiologies, 1990-2021, for 204 countries and territories: a systematic analysis for the global burden of disease study 2021[J]. The Lancet Infectious Diseases，2025，25(5)：519-536.

[18] 刘芳琴，张璐，陈玉，等 . 我国 17 个省市鸡源及猪源沙门菌的血清型、耐药性及传播风险分析 [J]. 中国兽医学报，2026，46(4)：836-844.

[19] BLEIBLO F A，EL-AWAMIE M W，ELSHARIF N A，et al. Burden of bacterial antimicrobial resistance in libya, 1970-2024: a systematic meta-analysis with projections to 2050[J]. Antibiotics (Basel). 2026，15(1)：92.

[20] 孙泽远，向令娴，李琳，等 . 沙门菌耐药基因水平转移机制及影响因素 [J]. 畜牧兽医学报，2026，57(1)：108-119.

[21] GUO Z，JIANG H，SONG A，et al. Progress and challenges in bacterial infection theranostics based on functional metal nanoparticles[J]. Advances in Colloid and Interface Science. 2024，332：103265.

[22] SHANG X，DAI L，CAO X，et al. Natural products in antiparasitic drug discovery: advances, opportunities and challenges[J]. Natural Products Reports. 2025，42(9)：1419-1458.

[23] 刘学贵，周静瑶，黄明远，等 . 基于分子对接从天然产物中虚拟筛选 HPPD 先导化合物 [J]. 江苏农业科学，2020，48(24)：95-102.

[24] XIE S，ZHAN F，ZHU J，et al. The latest advances with natural products in drug discovery and opportunities for the future: a 2025 update[J]. Expert Opin Drug Discov. 2025，20(7)：827-843.

[25] 段永辉，姚玲玉，牛航迪，等 . 花椒 - 艾叶抑菌搽剂制备工艺、质量控制及活性检测研究 [J]. 山西中医药大学学报，2026，27(3)：273-281+286.

[26] 程哲灏，潘美华，陈煜垠，等 . 响应面优化苹果皮多酚超声波提取与抗氧化性、抑菌能力检测 [J]. 生物化工，2025，11(2)：65-70.

[27] XU L，CHEN Y，SHENG Y，et al. Optimization of Polysaccharide Extraction from Astragalus and Five-Ginseng Decoction Using Orthogonal Test[J]. Pharmacognosy Magazine，2026，22(2)：490-496.

[28] 杨凯，杨怡琴，徐翱昌，等 . 中药现代化浓缩新技术与装备：现状、挑战及发展趋势 [J/OL]. 中国中药杂志，1-12[2026-05-16]. https: //link.cnki.net/urlid/11.2272.R.20260311.1407.003.

[29] FERNANDES S E，CAMPOS L D C，FILHO P L J，et al. Antimicrobial and Anti-Infective Activity of Natural Products: Unveiling Mechanisms, Synergies, and Translational Applications[J]. Antibiotics，2025，14(11)：1163-1163.

[30] 李子杨，相亦飞，钟雅文，等 . 中药有效成分的提取分离技术研究现状 [J]. 动物医学进展，2025，46(9)： 116-120.

[31] REBECCA J，ELLI M，GAD F. Typhoidal Salmonella: Distinctive virulence factors and pathogenesis[J]. Cellular microbiology, 2018，20(9)：e12939.

[32] 徐蒙恩，贺子嘉，李日顺，等 . 沙门菌生物被膜的构成和形成机理研究进展 [J]. 信阳师范大学学报 ( 自然科学版 )，2026，39(2)：243-249.

责任编辑：邵丽竹

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