483表格：洁净室一旦出现霉菌是否必须要调查？

2025-04-27

对于洁净区的环境检测，一般会设置警戒限和行动限，每个环境样品的微生物检测结果都要与警戒限和行动限进行对比，超过警戒限后需要进行调查。

公司：Revive Rx LLC

FEI号：3016710945

检查日期：2025年1月27日至2月7日

公布日期：2025年03月28日

基本信息：美国无菌和非无菌药企，7页7条观察项

对于洁净区的环境检测，一般会设置警戒限和行动限，每个环境样品的微生物检测结果都要与警戒限和行动限进行对比，超过警戒限后需要进行调查。这两天有读者朋友咨询，是否所有洁净区一旦检测出霉菌就需要调查，即使没有超警戒限。

博主近期也听到了类似的风声，传言这是FDA的要求，针对这条很多企业已经被开了缺陷项了。博主查询了欧盟的《无菌》附录、国内的《无菌药品》附录征求意见稿以及FDA的《无菌工艺生产无菌药品指南》，都没有发现相关的要求。也问了Kimi、Deepseek和ChatGPT，有的说没有要求，有的说有要求。对于说有要求的，一查出处却找不到相关要求，AI系统有时也是瞎总结。

如果有读者朋友了解相关法规或指南的，有劳分享一下。在近期的发布的483表格中，博主找到了类似这种情况的缺陷。

Observation 2 观察项2

Microbial contamination was present in the ISO 5 area and areas adjacent to production areas.Specifically，

ISO5 （B级）区域和毗邻生产区域的地方存在微生物污染，具体为：

A. Your firm fails to add additional routine environmental monitoring to the ISO 5 and ISO 7 critical areas to ensure that the processing conditions are free of mold, yeast, and other spore forming microorganisms found in your ISO7 cleanroom areas and during routine personnel gowning qualifications.

该公司未在 ISO 5（B级）和 ISO 7（C级）关键区域增加额外的日常环境监测，以确保生产条件没有霉菌、酵母菌和其他易于形成孢子的微生物，已在ISO7（C级）洁净区和日常人员洁净服监测中发现了这些微生物。

i. On 01/24/2024, a recovery of Too Numerous To Count (TNTC) CFU of a gram-positive, spore forming bacteria, Paenibacillus glucanolyticus, was recovered in the ISO 7 prep cleanroom used to prepare and mix solutions;

2024年1 月 24 日，在用于配制和混合溶液的 ISO 7（C级）配制间中检测到无法计数（TNTC）的易于形成孢子的革兰氏阳性解聚糖类芽孢杆菌。

ii. On 11/23/2023, a 3CFU recovery of mold, Penicillium sumatrense, was recovered in the ISO 7 preparation (b)(4) hood used to prepare and mix solutions;

2023年11 月 23 日，在用于配制和混合溶液的 ISO 7（C级）XX配制罩中检测到3CFU 的霉菌苏门答腊青霉。

iii. On 08/01/2023, there were three separate recoveries inside the ISO 7 negative pressure clean room used in the processing of drug products intended to be sterile, 1 CFU of a unknown species of Streptococcus, 2CFU of mold microorganism, Penicillium ciltrinum, and 3 CFU of another mold species, Penicillium sumatrense.

2023年8 月 1 日，用于无菌药品生产的ISO 7（C级）负压洁净室内检测到3 个分离的菌落、1 CFU某种未知链球菌、2 CFU 的柠檬青霉以及3 CFU苏门答腊青霉。

iv. On 09/03/2024, a passing gowning competency check for aseptic operator (b)(4) was sampled to have 1 CFU of Aspergillus and 2 CFUs of a gram-positive cocci, both recovered on their forehead.

2024年 9 月 3 日，对无菌操作人员 XX 进行了更衣确认，在其额头检测出 1 CFU 曲霉菌和 2 CFU 革兰氏阳性球菌。

B. While your firm has defined an action limit of (b)(4) CFU it was changed in December 2024 to a specification of (b)(4) CFU within the ISO 5 critical area. Your firm failed to address these excursions and released the following batches for distribution:

虽然该公司已定义了XX CFU 的行动限，但已于 2024 年 12 月将ISO 5 关键区域的标准变更为XX CFU。该公司未能解决这些超标，并放行了以下批次：

i. On 12/4/2024, your firm had 1 cfu recovery identified as Staphylococcus species in hood (b)(4) during the production of Tirzepatide Lot: 10090131, BUD: 06/02/2025.

2024年12 月 4 日，该公司在 Tirzepatide（批号：10090131，受益使用日期：2025 年 6 月 2 日）的生产过程中，在XX层流罩中检测到 1 cfu 微生物，被鉴定为葡萄球菌属。

ii. On 10/2/2024, your firm had 1 CFU recovery identified as Actinomyces species in hood (b)(4) during the production of Testosterone cypionate, Lot: 9685326 BUD: 03/25/2025.

2024年10 月 2 日，该公司在睾酮环戊丙酸酯（批号：9685326，受益使用日期：2025 年 3月 25 日）的生产过程中，在XX层流罩中检测到 1 CFU放线菌属。

iii. On 06/24/2024., your firm had two recoveries in hood 3 during the production of HCG12,000 unit vials Lot 9089665 BUD:12/21/2024. The initial sample had 1 CFU identified as Staphylococcus epidemidis and 2 CFU identified as Staphylococcus hominis.

2024年6 月 24 日，该公司在HCG（12000瓶，批号：9089665，受益使用日期：2024年 12月 24 日）的生产期间，在层流罩3中有2个样品检测到微生物，其中一个有1 CFU 表皮葡萄球菌，2 CFU人葡萄球菌。

C. On 08/1/2023, your firm had ten separate recoveries identified as either Neissaria, Penicillium citrinum, Cladosporium, Streptococcus or Micrococcus species within your ISO 7 hazardous negative cleanroom, which was not addressed through an investigation, additional sampling, or robust cleaning. Furthermore, on 08/01/2023, two recoveries out of the ten documented having 2 CFUs and 1 CFU (Action Limit (b)(4) CFUs) identified as Micrococcus luteus and one recovery of 1CFU identified as Micrococcus species found in BSC hood# (b)(4) which was used to produce sterile drug product.

2023年8月1日，该公司在ISO 7有害负压洁净室中有10个独立的微生物回收，被鉴定为奈瑟菌、柠檬青霉、曲霉菌、链球菌或微球菌，没有通过调查、额外取样或有效清洁来解决。此外，在2023年8月1日，在用于生产无菌药品的XX BSC中，记录的10个微生物回收中有2个CFU和1个CFU(行动限为XCFU）被鉴定为微黄色微球菌，一个回收的1CFU被鉴定为微球菌，用于生产无菌药品。

D. On 08/06/2024, your aseptic technician performed a gloved fingertip sample during a media fill perfo1mance while inside of BSC hood (b)(4) and a recovery of 1 CFU (Action Limit (b)(4) CFU) of Bacillus species was found. Both media fill and environmental monitoring performed in concert are documented as successful without any evaluation for the microorganism recovery.