中药材五味子为木兰科植物五味子的干燥成熟果实，其主要功效为收敛固涩、益气生津、补肾宁心，用于久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗盗汗，津伤口渴，内热消渴，心悸失眠^[1]，是中药制剂五味子颗粒的主要原料。相关文献研究表明，五味子含有木脂素、有机酸、挥发油、多糖、氨基酸、鞣质等多种化学成分，其中木脂素具有护肝、抗氧化的作用，挥发油、有机酸具有祛痰、镇咳的作用，多糖具有抗衰老、提高免疫力的作用^[2-4]。本文的研究采用正交试验方法，对五味子提取时间、溶媒用量、提取次数等工艺进行优选，为五味子颗粒及相关中药制剂的研发，提供必要的参考依据。

1 实验材料

1.1 设备

CS-100型粗碎机，1793型索氏提取器；HH-S型数显水浴锅，电加热套；N-3000N-3010-10L旋转蒸发仪，SHB-III型循环水式多用真空泵，CH-10槽型混合机，YK-60摇摆制粒机，CT-C热风循环烘箱。

1.2 原辅料

五味子药材、药用乙醇、玉米淀粉、糊精、蔗糖等原料、辅料，经检验符合《中国药典》现行版质量标准。

2 方法与结果

2.1 提取工艺的因素水平的确定

称取原药材五味子600g（可制成五味子颗粒2000 g），经挑选、粗碎后置于索氏提取器浸泡1 h后开始进行提取，提取液分别真空减压浓缩至料液比1：1（g/mL），加入3倍量乙醇静置24 h，上清液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.2稠膏。选择提取时间（A）、纯化水用量（B）、提取次数（C）3个影响因素，每个因素设3个水平。五味子提取工艺的正交试验因素水平如表1所示。

2.2 实验方法与结果

采用L9（3）4正交表安排试验，以五味子颗粒浸膏收率和浸膏粉的五味子醇甲含量为考察指标。五味子提取工艺的正交试验安排及结果如表2所示，浸膏收率方差分析结果如表3所示，五味子醇甲含量方差分析结果如表4所示。

从正交试验的结果和方差分析得知：各因素、水平之间无显著差异，影响最大的因素为C，影响因素的主次顺序为C＞A＞B。最佳提取工艺为A2B2C3，即提取时间为180 min、纯化水用量16倍、提取3次浸膏粉的五味子醇甲含量高，且浸膏收率最高。

2.3 结果分析

优选的五味子提取工艺为：提取时间为180 min、纯化水用量为16倍量、提取3次，浸膏收率和浸膏粉的五味子醇甲含量最高。

结合小试的实际情况，综合考虑降低工时、节约能源等因素，五味子颗粒最佳提取工艺为：第1次纯化水用量为8倍量，提取时间为60 min；第2次纯化水用量为4倍量，提取时间为60 min；第3次纯化水用量为4倍量，提取时间为60 min。之后进行中试实验验证。

2.4 提取中试验证

2.4.1 五味子提取中试工艺验证

按以上拟定的提取工艺进行5次中试实验验证，每次按五味子颗粒每袋装10 g的量制备200袋（即2 000 g），取五味子药材600 g，经挑选、粗碎后置于多功能微型提取浓缩机组，浸泡1 h后开始提取、减压浓缩。第1次纯化水用量为8倍量，提取时间为60  min；第2次纯化水用量为4倍量，提取时间为60 min；第3次纯化水用量为4倍量，提取时间为60 min。提取液分别真空减压浓缩至料液比1：1（单位g/mL），加3倍量乙醇静置24 h，上清液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.2稠膏。

2.4.2 合格标准

浸膏密度：（热测）1.2±0.1。

浸膏收率：五味子浸膏收率不低于20%。

含量测定：每袋浸膏粉含五味子醇甲不得少于1.30 mg。

2.4.3 检测结果对比

经过5次中试实验，每次取样对浸膏密度、浸膏收率以及每袋浸膏粉的五味子醇甲含量进行检测，其检测结果如表5所示。

结果表明，通过对浸膏测定检测结果的对比，五味子提取的浸膏密度、浸膏收率和浸膏粉的五味子醇甲含量均符合合格标准。试验表明优选的五味子工艺提取时间、纯化水用量、提取次数等工艺参数重现性好，中试工艺稳定。

2.5 五味子颗粒制粒中试验证

2.5.1 五味子颗粒中试制粒工艺验证

取五味子浸膏粉全量加淀粉400 g、糊精200 g、糖粉1 300 g置于槽型混合机混匀，加70%乙醇制软材，摇摆颗粒机14目制粒，于60 ℃以下低温干燥^[5]。每次制备200袋（合2 000 g）按每袋装10 g，连续5次进行制粒工艺验证。

2.5.2 合格标准

颗粒水分：＜5.0%。

装量检查：每袋装10 g。

含量检查：每袋含五味子醇甲不得少于1.30 mg。

2.5.3 检测结果对比

经过5次中试实验，每次取样对浸膏密度、浸膏收率以及浸膏粉的五味子醇甲含量进行检测，其检测结果如表6所示。

结果表明，通过对五味子制粒中试结果的对比，五味子颗粒的颗粒水分均小于5.0%，装量检查均控制在10.0 g/袋，五味子醇甲含量检查在1.48 mg/袋至1.56 mg/袋之间，均符合每袋不得少于1.30 mg/袋的标准要求。制粒工艺参数重现性好，中试工艺稳定。

3 结语

本次工艺研究优选的五味子提取工艺参数：第1次纯化水用量为8倍量，提取时间为60 min；第2次纯化水用量为4倍量，提取时间为60 min；第3次纯化水用量为4倍量，提取时间为60 min。五味子提取工艺的参数重现性好，中试工艺稳定，可作为五味子颗粒及相关中药制剂研发的参考依据。对于五味子选用不同浓度的乙醇进行提取，是否对五味子醇甲含量有影响，还有待进行进一步相应的工艺研究。

【参考文献】

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：66.

[2] 杨擎，曲晓波，李辉，等.五味子化学成分与药理作用研究进展[J].吉林中医药，2015，0（6）：626-628.

[3] 孙文娟，吕文伟，于晓凤，等.北五味子粗多糖抗衰老作用的实验研究[J].中国老年学杂志，2001，21（6）：454-455.

[4] 沈建华.五味子有效成分的提取与分离[J].临床医药文献杂志（电子版），2018（43）：169-170.

[5] 尚海宾.板蓝根无糖颗粒木糖醇制备工艺研究[J].流程工业，2019（8）：68-71.