液相Northern杂交快速检测植物microRNA

文章来源:生物谷 发布时间:2011-04-08

来自四川大学生命科学学院的研究人员提出了一种利用液相Northern杂交来分析植物s的新方法,并分析做了相应的条件优化。这一研究成果公布在Int J Mol Sci.杂志上,并且获得了“Faculty of 1000 Biology ”(简称F1000)的推荐。

领导这一研究的是四川大学生科院博士生导师王胜华教授,文章的第一作者是其研究生王小粟,王胜华教授研究组主要研究方向是非编码RNA与植物生殖发育,植物发育的分子机理,植物与环境关系等。

F1000专家,西班牙植物生物技术与研究中心的Julia Kehr点评这一文章:“这篇论文描述了一种称为liquid Northern hybridization(液相Northern杂交)的方法及其条件优化,此方法可用来快速检测并定量植物microRNA”。

microRNA (miRNA)是一组在进化上高度保守、非编码蛋白、参与转录后调节的小分子RNA。分析miRNA的加工机制及功能,定量研究miRNA的表达水平可以采用Northern杂交的方法。Northern杂交是指将待测RNA样品经电泳分离后转移到固相支持物上,然后与标记的核酸探针进行固相液相杂交,用以检测RNA的方法。但是这种方法费时较长,而且不一定能获得准确的结果。

在这篇文章中,研究人员将传统Northern杂交改进为液相Northern杂交,从而简便、准确、灵敏地杂交检测miRNA等小分子RNA,整个过程仅需几小时即可完成,还可以用于定量分析及在同一个实验中检测不同长度差异的小分子RNA。

这一方法的特点主要为:1. 相比传统的杂交检测方法,可以大大降低实验操作繁琐程度,缩短实验流程,减少实验耗费。2. 采用荧光标记的寡核苷酸探针,对实验人员造成的身体伤害少,污染小。3. 具有很好的检测特异性,可以区分1个碱基错配的microRNA,同时还可以采用不同颜色的荧光探针同时检测多个不同的microRNA。4. 可以对microRNA的表达做定量分析。因此,该方法可用于快速检测植物中各种小RNA,如miRNA及等。

“Faculty of 1000 Biology”创办于2002年1月,是一种在线科研评价系统,其推荐原则立足于论文本身的科学意义而非发表在什么杂志上。该系统根据全球2300多名资深科学家的意见,提供对近期发表的生物科学论文的快速评论,目的是帮助广大科研人员遴选和发现有价值的研究工作。该机构专家根据论文对当前世界生物医学和临床实践的贡献程度和科学价值,每年对全球SCI文章总数不足千分之二的优秀精品医学论文进行推荐和点评,并赋予“F1000论文”称号向医学界推荐,涵盖了医学各个学科,是一项很高的学术荣誉。

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