目的：建立HPCL 法测定注射用盐酸左氧氟沙星含量的方法—— 方法：色谱柱：Agilent XDB-C18(5μm，4.6×150mm)。流动相：己烷磺酸钠溶液[ 取己烷磺酸钠0.98g，加磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.8g ;加水溶解并稀释至1000ml，加0.05mol/L 磷酸溶液约500ml，使pH 值至2.4)1000ml，使溶解，摇匀，即得I- 甲醇(3：1)。流速1.0ml·min-1，检测波长293nm，柱温40℃，进样量10μl。结果：在50.16~150.47μg/ml 浓度范围内线性良好，回归方程Y=60，64X+76.55(γ=0.9997)，平均回收率为100.71%，RSD=1.67%。结论：本方法简便，准确，可靠，能有效控制注射用盐酸左氧氟沙星的含量。

注射用盐酸左氧氟沙星是目前临床中常用的抗菌药，其作用机制是抑制细菌，DNA 旋转酶，参考文献(1)、(2)采用高效液相色谱法。本产品适用于敏感细菌所引起的下列中、重度感染：(1)呼吸系统感染：急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作、弥漫性细支气管炎、支气管扩张合并感染、肺炎、扁桃体炎(扁桃体周围脓肿);(2)泌尿系统感染：肾盂肾炎、复杂性尿路感染;(3)生殖系统感染：急性前列腺炎、急性副睾炎、宫腔感染、子宫附件炎、盆腔炎(疑有厌氧菌感染时可合用甲硝唑);(4)皮肤软组织感染：传染性脓疱病、蜂窝组织炎、淋巴管(结)炎、皮下脓肿、肛周脓肿等;(5)肠道感染：细菌性痢疾、感染性肠炎、沙门菌属肠炎、伤寒及副伤寒;(6)败血症、粒细胞减少及免疫功能低下患者的各种感染;(7)其他感染：乳腺炎、外伤、烧伤及手术后伤口感染、腹腔感染(必要时合用甲硝唑)、胆囊炎、胆管炎、骨与关节感染以及五官科感染等。对该品种考察了色谱条件和定量的线性范围，对冻干粉针剂进行含量测定，结果表明，本法简便，专属性强。

仪器与试药

仪器：Agilent 1200 系列高效液相色谱仪

试药：左氧氟沙星对照品(中国药品生物制品检定所，批号：130454-201304 ; 含量97.2%);注射用盐酸左氧氟沙星(杭州澳亚， 批号20140491，20140492，20140493)

试剂：甲醇为色谱纯，己烷磺酸钠、磷酸二氢钾、磷酸为分析纯，水为纯化水

方法与结果

色谱条件：色谱柱：AgilentXDB-C18(5μm，150×4.6mm)，流动相：己烷磺酸钠溶液[ 取己烷磺酸钠0.98g，加磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.8g ;加水溶解并稀释至1000ml， 加0.05mol/L 磷酸溶液约500ml，使pH 值至2.4)1000ml， 使溶解， 摇匀， 即得。I- 甲醇(3 ：1)。流速1.0ml/min，检测波长293nm，柱温40℃，进样量10μl。

线性关系：精密称取左氧氟沙星对照品25.8μg，量25ml 量瓶中， 加0.03mol/L 盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取0.5ml、0.8ml、1ml、1.2ml、1.5ml 至10ml 量瓶中， 加流动相稀释至刻度， 摇匀。分别进样10μl，记录色谱图，以峰面积(Y)对浓度(X)进行线性回归。得回归方程为Y=60.64X+76.55(γ=0.9997)。结果表明左氧氟沙星在50.16~150.47μg/ml 浓度范围内线性良好，结果见表1，图1。

精密度试验：取左氧氟沙星对照品溶液，连续进样5 次，记录色谱峰面积，结果RSD 为0.31%，表明精密度良好。

重复性试验：取同一批样品( 批号：20140491)， 按“ 样品含量测定”项下的方法，测定6 次，其含量测定结果的RSD 为0.37%。

回收率试验：采用加样回收法，取已知含量的样品适量，精密加入左氧氟沙星对照品适量，按色谱条件测定回收率，结果见表2。

稳定性试验：取同一批样品溶液(批号：20140491)，分别按色谱条件于0、1、2、3、4、6h进行测定，记录色谱图。结果左氧氟沙星峰面积的RSD 为0.15%(n=6)，表明供试品溶液在6h 内稳定。

样品含量测定：分别取3 批样品适量(约相当于左氧氟沙星50mg)置50ml 量瓶中，精密称定，加0.03mol/L 盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶液5ml，置另一50ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，另取左氧氟沙星对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算出供试品中左氧氟沙星(C18H20FN3O4) 的含量， 结果见表3.

讨论

由于盐酸左氧氟沙星见光易分解，采用HPLC 法比较好地将杂质与主成分分离，提高检测的准确度。本法简单易行，灵敏度高，比较准确地测定了注射用盐酸左氧氟沙星量中左氧氟沙星的含量，可用于该产品的质量控制。

【参考文献】

[1] 国家药典委员会审定，国家食品药品监督管理局国家药品标准WS1-(X-049)-2005Z

[2] 王海燕、徐宏祥、徐善超，离子对- 反相高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星胶囊的含量[J] 中国药业，2002，11(9)：44-45。

本文作者供职于杭州澳亚生物技术有限公司。