病毒体的核酸检测,目前主要依靠PCR技术,随着PCR的普及,很多病毒都可以通过这种方法检出,其具有窗口期短,准确性、特异性高等特点。这种技术对样本的选择比较多样化,包括液体血液、干血斑、组织细胞等均可以作为其样本。
近年来,国外不断有应用滤纸片干血斑来检测HIV抗体、HIVDNA及RNA的报道,滤纸片是外周血采集和运输的极好载体,外周血滴在滤纸片上可以制成滤纸片干血斑,有很好的生物稳定性,并且方便贮存与运输。我国是一个地域十分广阔的大国,各地经济科技实力差异较大,为了在我国开展与推广这项技术,国家艾滋病参比实验室(NARL)从2004年开始,应用滤纸片干血斑检测HIV抗体、DNA、基因分型与病毒载量测定等方面的研究,并于2012年4月举办了第一次“全国滤纸片干血斑HIVDNA检测技术培训班”。
研究表明血样的滤纸片干血斑样本与血浆样本用EIA法检测,符合率为 100%,相关性为0.919;两种样本经WB确认,条带完全一致的占总数的42.85%,其中主要条带(至少有2条env带出现,或至少1条env和 p24带同时出现)的符合率为100%。其次,应用滤纸片干血斑检测HIV前病毒DNA,结果发现, 在重复2-3次的前提下,滤纸干血斑样本HIV感染基因诊断敏感度与全血样本比较无统计学显著性差异。22份两种阴性样本特异性均为100%(CI 95.93%100%)。18对全血和滤纸干血斑样本HIV基因诊断一致性分析,符合率94%。进一步又研究了应用滤纸片干血斑样本用于HIV基因序列测定和亚型分析,结果发现,干血斑样本与全血样本DNA PCR产物亚型分析一致,氨基酸序列比对同义和非同义替换比例、位置和类型基本一致。
鉴于上述研究,为保证在实际操作过程中实验室的检测质量,国家艾滋病参比实验室制订了能力验证计划,计划包括制备能力验证盘并定期提供开展此工作的各实验室和对其检测结果进行评价。目前,全国已有15个实验室参加了技术培训, 包括上海维斯塔(www.i-vst.com)的合作单位上海公共卫生中心实验室在内的13个实验室参加并完成了国家艾滋病参比实验室的第一次能力验证活动。
2024-09-02
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近年来,RNA疗法及其在疾病治疗中的潜力备受关注,今年诺贝尔生理学或医学奖授予微小RNA(microRNA)领域的研究更是将这一热度推向高峰。在新药研发蓬勃发展的今天,小核酸药物被视为继小分子药和抗体药之后的“第三次制药浪潮”的关键力量。
作者:崔芳菲
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