6种实验室灭菌方法，别只知道高温高压灭菌了

2025-02-10

有效的实验室灭菌方法对于处理分离的细胞系至关重要。培养物在处理前必须进行消毒。

尽管温高压灭菌是实验室最常用的灭菌方法，但其他灭菌方法仍然有很多用处和优势。以下是6种常见的实验室灭菌方法。

（1）湿热（高压灭菌）法

大多数实验室使用高压灭菌作为他们首选的实验室灭菌方法，使用加压蒸汽加热待灭菌的材料。这是一种非常有效的方法，可以杀死所有微生物、孢子和病毒，尽管对于某些特定的虫子，尤其需要高温或孵育时间。

高压灭菌通过细胞蛋白质的水解和凝固来杀死微生物，这是通过在水存在下进行高温来有效实现的。

蒸汽会带来强烈的热量。加压蒸汽潜热高;在 100°C 时，它所持有的热量是相同温度下水的7倍。这些热量在与待灭菌材料的较冷表面接触时释放出来，从而可以快速传递热量并很好地渗透致密材料。在这些温度下，水在水解蛋白质方面做得很好，所以这些虫子没有机会存活。

（2）干热灭菌法（燃烧、烘烤）

干热与高压灭菌有一个关键区别——没有水，所以蛋白质水解不会发生。

相反，干热往往会通过细胞成分的氧化来杀死微生物。这比蛋白质水解需要更多的能量，因此需要更高的温度才能使用干热进行高效灭菌。

例如，通过在 121°C 下高压灭菌，通常可以在 15 分钟内完成灭菌，而干热通常需要 160°C 的温度才能在类似的时间内完成灭菌。

（3）过滤除菌法

过滤是无需加热即可快速对溶液进行灭菌的好方法。过滤器的工作原理是将溶液通过孔径太小而微生物无法通过的过滤器。过滤器可以是由热熔玻璃颗粒制成的烧结玻璃漏斗，或者现在更常见的是由纤维素酯制成的膜过滤器。为了去除细菌，通常使用平均孔径为 0.2μm 的过滤器。

但请记住，病毒和噬菌体可以通过这些过滤器，因此如果这些是一个问题，过滤不是一种好的实验室灭菌方法。

（4）使用溶剂除菌

乙醇通常用作消毒剂，但异丙醇更擅长溶解脂质，可能是更好的选择。这两种溶剂都是通过使蛋白质变性起作用的，尽管该过程需要水。因此，为了有效，它们必须稍微稀释，从 100% 稀释到 60-90%，剩下的 % 是水。

同样，重要的是要记住，虽然乙醇和异丙醇擅长杀死微生物细胞，但它们对孢子没有影响。

（5）辐射灭菌法

紫外线、X 射线和伽马射线都是对 DNA 具有深远破坏性影响的电磁辐射，因此它们是极好的消毒工具。就它们的有效性而言，它们之间的主要区别在于它们的渗透率。

紫外线在空气中的渗透性有限，因此消毒只发生在灯周围相当小的区域。但是，它相对安全，并且对于小区域（如层流罩）的消毒非常有用。（记住对设备进行消毒也非常重要。

X 射线和伽马射线的穿透性要强得多，这使得它们更加危险，但它们对于制造过程中塑料物品（例如注射器）的大规模冷灭菌非常有效。

（6）气体灭菌法

环氧乙烷可用于对热或湿敏感的设备进行消毒，通常用于对导管和支架等医疗设备进行消毒。环氧乙烷基本上通过烷基化阻止细胞代谢和复制。由于环氧乙烷很容易被吸收，因此必须在灭菌后对设备进行充气以去除任何残留物。

环氧乙烷还具有剧毒，可能会带来许多健康风险。由于它通常用于医疗保健产品，因此您不太可能在实验室中使用它。

内容来源：智者不学生物

责任编辑：邵丽竹

审　　核：何发