【GMP】注射用水检测标准和方法

我又何尝饶过岁月 2023-04-12

【GMP】注射用水检测标准和方法

1 编制依据:现行版本中国药典；

2 质量标准指标

序号	项目名称	ChP(2020)
1	性状	无色的澄明液体；无臭。
2	pH值	5.0～7.0
3	硝酸盐	≤0.000006%
4	亚硝酸盐	≤0.000002%
5	氨	≤0.00002%
6	电导率	25℃,≤1.3
7	TOC	≤0.50mg/L
8	不挥发物	≤1mg/100ml
9	重金属	≤0.00001%
10	铝	/
11	微生物限度	TAMC≤10cfu/100ml
12	细菌内毒素	＜0.25EU/ml
备注：日常检查参照企业标准执行。

3、取样:取样步骤

开启水阀排水1分钟后进行取样。
取样时，冲洗取样瓶内壁至少3次（取微生物限度及细菌内毒素水样勿需冲洗），装取所需水量，密封瓶口，用油性笔标记位点编号。
排水可采取外部连接管方式对取样口进行排水，但取样时只能在使用点进行取样，不得通过外接管方式对使用点进行取样。

4、检验操作方法

A、性状

仪器：比色管。

操作：

颜色与澄明度：取样品适量，目测检查，观察并记录现象。
用手挥动样品上方空气少许到鼻腔，闻样品气味，并记录结果。

标准规定：无色的澄明液体；无臭。

B、pH值

仪器：pH计。

试剂：pH4.00、pH6.86标准缓冲液、饱和氯化钾溶液。

操作：取样品100ml，加饱和氯化钾溶液0.3ml，混匀，按pH计使用标准操作规程和pH值测定法标准操作规程测定pH值两次。将两次测定pH值结果进行平均计算即得。

标准规定：pH值应为5.0~7.0。

C、氨

试剂：水、碱性碘化汞钾试液、氯化铵溶液、无氨水。

操作：取50ml比色管两支，第一管加样品50ml；第二管加氯化铵溶液1.0ml，加无氨水48ml。两管同样加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟，比较两管产生的颜色。

标准规定：样品溶液所显颜色与氯化铵对照液所显颜色比较，不得更深（0.00002%）。

D、硝酸盐

仪器：恒温水浴锅。

试剂与溶液：水、硫酸、10%氯化钾溶液、0.1%二苯胺硫酸溶液、标准硝酸盐贮备液、无硝酸盐的水。

标准硝酸盐溶液配制：精密量取1ml标准硝酸盐贮备液置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，再精密量取10ml置100ml容量瓶中，加水稀释成 100ml，摇匀，即得，每1ml相当于1μg的NO₃。

操作：取10ml比色管2支，一支加5ml样品，另一支加0.3 ml标准硝酸盐溶液，加无硝酸盐的水4.7ml。将两管同置冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将比色管于50℃水浴中放置15分钟，比较两管所产生的颜色。

标准规定：样品溶液所显蓝色与标准硝酸盐对照液所显蓝色比较，不得更深（0.000006%）。

E、亚硝酸盐

试剂与溶液：水、对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）、盐酸萘乙二胺溶液（0.1→100）、标准亚硝酸盐贮备液、无亚硝酸盐的水。

标准亚硝酸盐溶液配制：精密量取1ml标准亚硝酸盐贮备液置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml稀释液置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得，每1ml相当于1μg的NO₂。

操作：取50ml比色管两支，第一管加样品10ml；第二管加标准亚硝酸盐溶行平均计算即得。

标准规定：pH值应为5.0~7.0。

F、总有机碳

仪器：总有机碳分析仪

试剂与溶液：蔗糖、1,4-对苯醌、酸剂、总有机碳检查用水。

系统适用性：取总有机碳检查用水及蔗糖（已恒重）、1,4-对苯醌对照品溶液进行系统适用性实验，响应效率应在85%～115%。

操作：取样品适量，进行测定，记录结果。

标准规定：总有机碳含量＜500ppb。

G、不挥发物

仪器：水浴锅、恒温干燥箱、电子天平。

操作：取样品100ml，置105℃恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥至恒重。

标准规定：遗留残渣不得过1mg。

H、重金属

试剂与溶液：水、醋酸盐缓冲液（pH3.5）、硫代乙酰胺溶液、丙三醇碱基混合液、标准铅贮备液。

标准铅溶液制备：精密量取标准铅溶液贮备液10ml置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得，每1ml相当于10μg的Pb,该溶液使用当天配制。硫代乙酰胺试液配制：取1ml硫代乙酰胺溶液与5ml丙三醇碱基混合液混合，在水浴中加热20秒,冷却，立即使用。

操作：

对照溶液配制：取50ml比色管，加标准铅溶液1.0ml，加19ml水，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水稀释至25ml，再加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，即得。
供试品溶液配制：取样品100ml于蒸发皿中，加水19ml，蒸发至约20ml，放冷，转移至50ml比色管中，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水稀释至25ml，再加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，即得。
两管同样放置2分钟，在白色背景下，从上向下观察，比较对照溶液与供试品溶液所产生的颜色。

标准规定：供试品溶液所产生的颜色与对照溶液所产生的颜色比较，不得更深（0.00001%）。

I、细菌内毒素

仪器用具：烘箱、恒温器、精密温度计、旋涡振荡器、移液器、无热原吸咀、小试管（10×75mm）、稀释用玻璃试管、刻度吸管。

试剂：细菌内毒素工作标准品、鲎试剂（0.25EU/ml）、细菌内毒素检查用水。

供试品最大有效稀释倍数：MVD=1ml/ml×0.25EU/ml÷0.25EU/ml =1倍

内毒素标准品稀释：取内毒素标准品一支加入检查用水适量，溶解振荡，制得内毒素标准溶液，用检查用水稀释制成0.5EU/ml内毒素溶液，每一步稀释过程不得大于10倍。

举例：取内毒素工作标准品（效价：70EU/支）一支，加入检查用水1.0ml，制得70EU/ml内毒素标准溶液，并如下步骤稀释：

供试品阳性对照制备：取内毒素标准品一支加入检查用水适量，溶解振荡，制得内毒素标准溶液，用供试品稀释制成0.5EU/ml内毒素溶液，每一步稀释过程不得大于10倍。

举例：取内毒素工作标准品（效价：70EU/支）一支，加入检查用水1.0ml，制得70EU/ml内毒素标准溶液，并如下步骤稀释：

鲎试剂复溶：取鲎试剂适量，分别加入适量检查用水溶解混匀，按每支0.1ml分配到10×75mm凝聚管。

检测：取本品，依SOP-QC-5047 细菌内毒素检测标准操作规程检测。

标准规定：细菌内毒素含量应小于0.25EU/ml。

J、微生物限度

仪器：湿热灭菌器、生化培养箱、薄膜滤器、两用泵。

滤膜：0.45μm 亲水性混合纤维素膜。

试剂：R2A培养基、pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液、75%消毒乙醇。

用具：试验用镊子、剪刀，注射器、刻度吸管等依SOP-QC-0016器具清洁、灭菌标准操作规程处理。

检验操作：

TAMC：取少量的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液润湿滤膜，取供试液200ml按薄膜过滤法过滤，过滤完毕取出滤膜，菌面朝上贴于R2A培养基平板上，平行操作两皿。
阴性对照：无菌操作取pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液10ml过滤，抽滤至干，取出滤膜，菌面朝上贴于R2A培养基平板上培养。平行操作两皿。
洁净区微生物动态监测：依微生物检查标准操作规程执行。
培养条件：于30～35℃培养5天，必要时延长培养时间至7天。
标准规定：TAMC≤5cfu/100ml，警戒线：1cfu/100ml，行动限：3cfu/100ml。